Developement of Pharmacologically Active Microcarriers transporting stem cells and releasing growth factors for cardiac regeneration
The July 5, 2012
Co-directeurs de thèse : Madame Claudia MONTERO-MENEI, Monsieur Claudio MUSCARI
La thérapie cellulaire constitue une stratégie prometteuse dans le traitement de l’infarctus du myocarde. Afin de mieux contrôler la survie, la différenciation et l’intégration des cellules greffées, nous avons tenté une approche d’ingénierie tissulaire en associant les cellules à un microvecteur comportant une surface biomimétique et pouvant libérer un facteur de croissance (FC), les microcarriers pharmacologiquement actifs (MPA). Parmi les cellules utilisées dans une telle approche, les cellules souches adultes dérivées du tissu adipeux (ADSC) ne soulèvent pas de problèmes d’ordre éthique et permettent de réaliser des greffes autologues. Ces cellules sont largement étudiées pour la régénération de nombreux tissus en vertu de leurs propriétés immuno-modulatrices, de leur capacité à sécréter des FC et chémokines, mais également de leur large potentiel de différenciation. Dans une première étape, nous avons étudié l’effet des molécules de la matrice extracellulaire et des MPA sur la différentiation en cardiomyocytes des ADSC en présence d’un cocktail de FC. Nous avons ainsi pu observer que l’apport du cocktail de FC permettait aux cellules de s’engager dans la voie de différentiation cardiaque après 2 semaines. En comparant l’effet de la laminine (LM) et de la fibronectine sur cette différentiation, nous avons pu observer que la LM permettait d’induire une différentiation dans une cellule plus mature et que ceci était potentialisée par un enrichissement du milieu en TGFβ1. Finalement, l’apport de MPA recouverts de LM favorisait une différentiation plus rapide des cellules en présence du cocktail. Les MPA peuvent également libérer un facteur de croissance de manière prolongée au cours du temps. Par conséquent, nous avons encapsulé 3 protéines, le VEGF, le HGF et l’IGF-1, et d’étudier leur effet sur les comportement des ADSC. Nous avons ainsi pu observer que des MPA libérant du HGF et de l’IGF-1 induisaient une différenciation de ADSC dans la voie cardiaque et que cette différentiation était également observée lorsque les complexes ADSC-MPA étaient intégrés dans un hydrogel thermosensible. Cependant, nous avons aussi observé que la quantité de protéines libérées à partir des MPA était plus faible dans le gel. Nous avons donc cherché dans une dernière partie à améliorer le profile de libération des protéines à partir des MPA en changeant la composition du polymère. Nous avons ainsi utilisé différents copolymères triblock PLGA-PEG-PLGA pour formuler des microsphères et évaluer leur rôle sur la libération de la protéine mais aussi sur la stabilité de celle-ci durant la dégradation du polymère.
